اولیگو سنتھیسائزر کا اصول
سالماتی حیاتیات اور جینیات کی تحقیق کے شعبوں میں، ڈی این اے کی ترکیب کی صلاحیت ایک اہم کردار ادا کرتی ہے۔ڈی این اے کی ترکیب میں ایک مخصوص ترتیب میں نیوکلیوٹائڈس کو ترتیب دے کر ڈی این اے مالیکیولز کی مصنوعی پیداوار شامل ہوتی ہے۔اس کو حاصل کرنے کے لیے، سائنسدان ایک طاقتور آلے پر انحصار کرتے ہیں جسے اولیگونوکلیوٹائڈ سنتھیسائزر کہا جاتا ہے، جسے ڈی این اے سنتھیسائزر بھی کہا جاتا ہے۔
ایک oligonucleotide synthesizer ایک جدید ترین آلہ ہے جو خود بخود مختصر DNA مالیکیولز کی ترکیب کرتا ہے جسے oligonucleotides کہتے ہیں۔ڈی این اے کے یہ چھوٹے کناروں کی لمبائی عام طور پر 10 سے 100 نیوکلیوٹائڈز ہوتی ہے اور یہ مختلف قسم کے ایپلی کیشنز میں ضروری تعمیراتی بلاکس ہیں جن میں پولیمریز چین ری ایکشن (PCR)، جین کی ترکیب، جینیاتی انجینئرنگ، اور ڈی این اے کی ترتیب شامل ہیں۔
Oligonucleotide synthesizers ایک تکنیک کے اصول پر کام کرتے ہیں جس کے نام سے جانا جاتا ہے۔ٹھوس مرحلے کی ترکیب.یہ طریقہ سب سے پہلے نوبل انعام یافتہ ڈاکٹر مارون کیروتھرز نے 1970 کی دہائی میں شروع کیا تھا اور ڈی این اے کی ترتیب کی ترکیب کو بڑھانے کے لیے کئی سالوں میں اسے بہتر کیا گیا ہے۔Oligonucleotide ترکیب کو بڑھتے ہوئے سلسلہ کے 5'-ٹرمینس میں نیوکلیوٹائڈ کی باقیات کے مرحلہ وار اضافے کے ذریعے انجام دیا جاتا ہے جب تک کہ مطلوبہ ترتیب کو جمع نہیں کیا جاتا ہے۔ہر اضافے کو ترکیب سائیکل کہا جاتا ہے اور چار کیمیائی رد عمل پر مشتمل ہوتا ہے:
مرحلہ 1: غیر مسدود کرنا (ڈیٹرائٹلیشن)---------مرحلہ 2: جوڑنا ---------مرحلہ 3: کیپنگ -----------مرحلہ 4: آکسیکرن
یہ عمل ہر نیوکلیوٹائڈ کے لیے دہرایا جاتا ہے جب تک کہ مطلوبہ ترتیب حاصل نہ ہوجائے۔لمبے oligonucleotides کے لیے، اس سائیکل کو پوری ترتیب کی ترکیب کے لیے کئی بار دہرانے کی ضرورت پڑ سکتی ہے۔ ترکیب سائیکل کے ہر مرحلے کو درست طریقے سے کنٹرول کرنے کی صلاحیت اولیگونوکلیوٹائڈ سنتھیسائزر کے لیے اہم ہے۔درست اور موثر ترکیب کو یقینی بنانے کے لیے استعمال کیے جانے والے ری ایجنٹس، جیسے نیوکلیوٹائڈز اور ایکٹیویٹر کو اعلیٰ معیار کا ہونا ضروری ہے۔اس کے علاوہ، ترکیب سازوں کو مطلوبہ جوڑے کے رد عمل کو فروغ دینے اور ناپسندیدہ رد عمل کو روکنے کے لیے اعلی درستگی والے درجہ حرارت پر قابو پانے اور دیگر ماحولیاتی حالات کی ضرورت ہوتی ہے۔
ایک بار جب ایک oligonucleotide مکمل طور پر ترکیب ہو جاتا ہے، تو اسے عام طور پر ٹھوس سپورٹ سے صاف کیا جاتا ہے اور کسی بھی بچ جانے والے حفاظتی گروہ یا نجاست کو دور کرنے کے لیے صاف کیا جاتا ہے۔صاف شدہ oligonucleotides پھر نیچے کی دھارے کے استعمال کے لیے تیار ہیں۔
ٹیکنالوجی میں پیشرفت نے ہائی تھرو پٹ oligonucleotide synthesizers کی ترقی کو قابل بنایا ہے جو بیک وقت سینکڑوں یا اس سے بھی ہزاروں oligonucleotides کی ترکیب کرنے کے قابل ہیں۔یہ آلات مائیکرو رے پر مبنی ترکیب کی ٹیکنالوجی کا استعمال کرتے ہیں، محققین کو مختلف قسم کے تحقیقی مقاصد کے لیے تیزی سے بڑی اولیگونوکلیوٹائڈ لائبریریاں بنانے کے قابل بناتے ہیں۔
خلاصہ یہ کہ اولیگونوکلیوٹائڈ سنتھیسائزرز کے پیچھے اصول ٹھوس مرحلے کی ترکیب کی تکنیکوں کے گرد گھومتے ہیں، جس میں ٹھوس سپورٹ پر نیوکلیوٹائڈز کا مرحلہ وار اضافہ شامل ہوتا ہے۔درست اور موثر ترکیب کے لیے ترکیب کے چکر کا درست کنٹرول اور اعلیٰ معیار کے ری ایجنٹس ضروری ہیں۔Oligo synthesizers DNA تحقیق میں ایک اہم کردار ادا کرتے ہیں، سائنسدانوں کو مختلف قسم کے ایپلی کیشنز کے لیے اپنی مرضی کے مطابق oligonucleotides پیدا کرنے کے قابل بناتے ہیں، جو بائیو ٹیکنالوجی اور جینیاتی تحقیق میں پیشرفت میں حصہ ڈالتے ہیں۔
پوسٹ ٹائم: اگست 01-2023