ڈی این اے کی ترکیب کا بنیادی اصول

کیمیائی ڈی این اے کی ترکیب ٹھوس مرحلے کی ترکیب کی حکمت عملی اور فاسفورامیڈائٹ کیمسٹری پر مبنی ہے۔حیاتیاتی DNA کی ترکیب سے مختلف، کیمیائی DNA کی ترکیب میں مواد DMT (4, 4-dimethoxytrityl) اور phosphoramidite modified deoxyriboxyside ہے، جیسا کہ شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔ DNA کی ترکیب ٹھوس سپورٹ پر کی جاتی ہے (ہم مختلف قسم کی پیشکش کر سکتے ہیں۔اولیگو سنتھیسس کالم)، یعنی سی پی جی (کنٹرولڈ پورر گلاس) اور پی ایس (پولیسٹیرین)، اور پوری ترکیب ایک پر کی جاتی ہے۔DNA/RNA سنتھیسائزرجو کہ ہمارا بنیادی سامان ہے، اس کے مختلف ماڈل ہیں جیسے: HY سنگل چینل سنتھیسائزر، HY-12، HY-192 اور وغیرہ، ترکیب کی سمت 3' سے 5' تک ہے، اور ایک نیوکلیوٹائڈ کو ایک کے ذریعے ٹھوس سپورٹ کے لیے متعارف کرایا جاتا ہے۔ ترکیب سائیکل.عام طور پر ترکیب کے چکر میں چار مراحل ہوتے ہیں، ڈیپروٹیکشن، کپلنگ، کیپنگ اور آکسیڈیشن (شکل 2)۔ڈی پروٹیکشن کو ٹھوس سپورٹ پر ڈی ایم ٹی گروپ یا پچھلے نیوکلیوسائیڈ پر 5' ہائیڈروکسیل گروپ کو ہٹانے کے لیے سیٹ کیا گیا ہے، ڈیکلورومیتھین میں 3% ٹرائیکلورواسیٹک ایسڈ کو ڈیپروٹیکشن ری ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔اس کے بعد فاسفورامیڈائٹ میں ترمیم شدہ ڈی آکسیریباکسی سائیڈ کو ایکٹیویٹر کی مدد سے ہائیڈروکسیل گروپ کو ظاہر کرنے کی اجازت دی گئی، یعنی 5-ethylthiotetrazole یا 4، 5-dicyanoimidazole، جس سے فاسفیٹٹریسٹر (III) کی تشکیل ہوئی، اور کپلنگ کے مرحلے کا احساس ہوا۔کپلنگ سٹیپ کے دوران غیر رد عمل نہ کیے گئے ہائیڈروکسیل گروپ کو بلاک کرنے کے لیے ایک کیپنگ سٹیپ کیا جاتا ہے، تاکہ ناپسندیدہ خرابی کے سلسلے کی تشکیل کو کم کیا جا سکے۔آخر میں، غیر مستحکم فاسفیٹٹریسٹر (III) کو کیمیکل سٹیبل فاسفورٹریسٹر (V) میں آکسائڈائز کیا جاتا ہے جس میں پائریڈین موجود میں آئوڈین بطور آکسیڈینٹ ہوتا ہے۔

ترکیب شدہ ڈی این اے امائنولائسز کے ذریعے ٹھوس سپورٹ سے کلیویج ہو سکتا ہے، فاسفورٹریسٹر پر 2-سائنو ایتھائل پروٹیکٹڈ گروپ اور نیوکلیوبیس پر امائیڈ کو ایک ہی وقت میں کلیویج کیا جاتا ہے، ریک میں سنتھیسس پلیٹس اور سنتھیسس کالم براہ راست ری ایکشن چیمبر میں رکھے جاتے ہیں۔ کےڈی پروٹیکشن کا سامان.خام ڈی این اے ایچ پی ایل سی، الیکٹروفورسس اور او پی سی کے ذریعہ ڈیمانڈ پر تیار کیا جاسکتا ہے، ہم آپ کو فراہم کر سکتے ہیںطہارت کا سامانپوسٹ پروسیسنگ کے لیے۔